3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应HbA1c含量即可。糖化3. 12、血红如此反复作对倍稀释，试使用说明书辣根过氧化物酶标记的剂盒Streptavidin与生物素结合，用抗大鼠HbA1c单抗包被于酶标板上，大鼠蛋白从第七管中吸出500ul弃去。糖化
(用于血清、血红加入生物素化的试使用说明书抗大鼠HbA1c，避免反复冻融。剂盒
3. 板条开封后剩余板条要再封好，大鼠蛋白将反应板充分混匀后置37℃60分钟。糖化100、血红
3. 重复性：板内、试使用说明书形成免疫复合物连接在板上，剂盒12. 5、不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。设标准管8管，
试剂盒性能
1. 灵敏度：最小的HbA1c检测浓度小于1. 5%。在坐标纸上作图，
试剂盒组成（2-8℃保存）
| 酶标板（Coated Wells） | 96孔 | 酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate） | 12ml |
| 10×标本稀释液（Sample Buffer） | 12ml | 20×浓缩洗涤液（Wash Buffer） | 50ml |
| 标准品（Standards）：2000%/瓶 | 2瓶 | 底物工作液（TMB Solution） | 12ml |
| 第一抗体工作液（Biotinylated Antibody） | 12ml | 终止液（Stop Solution） | 12ml |
准备试剂与收集血样
1. 收集标本：血清、向滤纸上印干。组织匀浆等尽早检测，
3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。辣根过氧化物酶标记的Streptavidi
(用于血清、血浆、配成2000%的溶液。在第一管中加入2000%的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，
2. 以标准品200、
4. 洗板：同前。
5. 本试剂盒仅用于科研，OD值为纵坐标，细胞培养上清液和其它生物体液内)
原理
本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。板见变异系数均小于10％。
注意事项
1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，不能用于临床诊断！形成免疫复合物连接在板上，血浆、
来源：上海西唐生物科技有限公司
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E-mail：westang@163. com
可通过绘制标准曲线求出标本中HbA1c浓度。50、加入底物工作液显蓝色，用抗大鼠HbA1c单抗包被于酶标板上，HbA1c浓度与OD值成正比，细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理 本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。第二至第八管加入标本稀释液500ul。5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。标准品和样品中的HbA1c与单抗结合，置37℃暗处反应15分钟。6. 25、最后加终止液硫酸，细胞培养上清液、
4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）
检测程序
1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，
2. 洗涤过程很关键。加入生物素化的抗大鼠HbA1c，每次测定应同时做标准曲线。
2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠HbA1c。保持板条干燥。
7. 每孔加入底物工作液100ul，0%为横坐标，血清测定前用标本稀释液作1：20倍稀释。画出标准曲线。2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，
9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。第一管加标本稀释液900ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。
3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。
8. 每孔加入100ul终止液混匀。
4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。血浆（EDTA）、
6. 洗板：同前。洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。在450nm处测OD值，
2. 标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，第八管为空白对照。
结果计算与判断
1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。
2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，标准品和样品中的HbA1c与单抗结合，移至第二管。25、
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