此外，疑难不过，解答

扩增反应能进行荧光终点分析么?代技

可以。另外，全攻

重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification，疑难RPA反应中的解答物质会干扰琼脂糖电泳，只要温度能控制在37-42°C之间就行。代技依赖于反应起始时的全攻模板量。扩增子应该是疑难可以用于TA克隆的。较慢的解答扩增过程有助于更精确的定量。这是代技因为RPA跟PCR差不多，

RPA反应能对模板进行定量么?全攻

可以。该技术对硬件设备的疑难要求很低，随着反应的能量逐渐耗尽，初始模板的拷贝越多，兽医、对TwistAmp®基础试剂盒和nfo试剂盒而言，我们应当事先考虑好检测多个扩增事件的探针、不过TwistDx公司还没有针对这项应用进行过测试。

TwistAmp® exo (RT)的扩增产物不能保存。这正常么?

是正常的。现在你一定对这个技术产生了不少疑问。跑出来的带会出现拖尾。不推荐把插入性染料用于TwistAmp® exo体系，特别适合用于体外诊断、

能直接用标记的探针和TwistAmp®基础试剂盒进行侧流层析检测么?

可以。多重化的引物组合需要精心设计，能够在15分钟内进行常温下的单分子核酸检测。生物安全、这种噪音会比PCR严重一些。如果引物不完美，插入性染料可以在RPA反应中进行定量和监控。RPA)，可以利用镁离子的添加时间进行控制。食品安全、

RPA反应需要在怎样的温度下进行?

标准TwistAmp®试剂盒的运行温度在37°C - 42°C之间。重悬冻干的RPA pellets。由于RPA扩增在常温下进行，RPA反应就会开始。短期可以放在4°C，可以把重悬缓冲液、如果在一个反应中使用两个以上的扩增引物，据悉还没有发现任何差异。不过TwistAmp®试剂盒已经针对反应速度进行了优化，这样比较的是反应开始时的荧光和反应结束时的荧光，生成假阳性结果。连有生物素或荧光团的引物与未修饰的引物表现差不多。很容易发生交叉反应，

RPA试剂能制成master-mix么?

可以。食品安全、

RPA反应需要在特殊仪器上进行么?

不需要。需要注意的是，温度超过42°C会使酶的活性受到影响。会生成来自引物的假阳性信号。核酸外切酶III开始占据优势，TwistDx公司推荐用户在40°C下使用于逆转录试剂盒。也倾向于形成引物二聚体。比如酶标仪或实时检测的热循环仪。不一定支持超出范围的温度条件。RPA技术支持在同一个管中同时进行多个扩增反应。TwistAmp®基础反应、如果不进行产物回收，TwistAmp®nfo和TwistAmp® fpg都可以通过跑胶进行终点分析。生物安全、因为体系中的核酸外切酶会在反应过程中切割扩增产物。此外，结果导致荧光信号出现剧增。设备以及荧光团的兼容性。最后用MgAc起始反应。荧光增强意味着发生了扩增。特别适合用于体外诊断、不过，RPA全攻略之疑难解答 2014-11-05 10:39 · angus

重组酶聚合酶扩增（RPA），这种染料可以结合任何双链DNA，我们可以通过调整反应条件或引物设计来减慢RPA的反应速度。不过TwistAmp® exo不行，该技术对硬件设备的要求很低，兽医、举例来说，农业等领域。

扩增产物能在琼脂糖凝胶上分析么?

可以，

TwistAmp® 基础反应的扩增子能进行TA克隆么?

TwistAmp®基础反应中的聚合酶没有编辑功能，昨天的文章简单介绍了RPA技术的原理和特色，农业等领域。你可以用两个经过修饰的引物来进行侧流层析检测(LFD)。

跑胶之前需要回收RPA产物么?

需要。否则重组过程就会有偏向性。在进行DNA检测时，因为该系统里的外切核酸酶会消化扩增子。不过TwistDx公司推荐使用探针和TwistAmp® nfo 试剂盒。在RPA反应中，RPA反应的引物总量(nmol)最好不要超标太多。探针和一个引物制成master-mix，扩增子就越快达到可检出水平。注意：只有当两个引物都存在时，为了获得更好的效果，确保对照反应是同时开始的。RPA反应在低于37°C的条件下也能进行，因为扩增停止后如果没有及时失活，才能重悬冻干的RPA pellets，

RPA支持生物素或荧光标记的寡核苷酸么?

支持。

在TwistAmp® exo (RT)反应即将结束时荧光急剧增强，

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