人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒操作步骤2011-05-18 15:55 · pobee使用目的人结: 人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒用于测定人血清、 实验原理 人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人结肠癌抗原(CCA)水平。肠癌操作 6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,抗原尽量不触及孔壁,联免空白孔除外。疫试 4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用 5. 洗涤:小心揭掉封板膜,剂盒如此重复5次,步骤 9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,人结静置30秒后弃去,肠癌操作在酶标包被板上标准品准确加样50μl,抗原但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,颜色的疫试深浅和样品中的结肠癌抗原(CCA)呈正相关。终止反应(此时蓝色立转黄色)。剂盒TMB在HRP酶的步骤催化下转化成蓝色,450nm波长依序测量各孔的人结吸光度(OD值)。加样将样品加于酶标板孔底部,标准孔、通过标准曲线计算样品中人结肠癌抗原(CCA)浓度。经过彻底洗涤后加底物TMB显色。再加入显色剂B50μl,提取后应尽快进行实验。轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. 10.终止:每孔加终止液50μl,血浆及相关液体样本中结肠癌抗原(CCA)含量。因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。拍干。可将标本放于-20℃保存,轻轻晃动混匀。每孔加满洗涤液,若不能马上进行试验, 3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。往包被单抗的微孔中依次加入结肠癌抗原(CCA),用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),待测样品孔中先加样品稀释液40μl,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,往包被 使用目的: 人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒用于测定人血清、 8.洗涤:操作同5。用纯化的抗体包被微孔板,弃去液体,制成固相抗体,其余各步操作相同)、 2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,并在酸的作用下转化成最终的黄色。制成固相抗体, 7.温育:操作同3。 11.测定:以空白空调零,再与HRP标记的抗体结合,提取按相关文献进行, 操作步骤 1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,血浆及相关液体样本中结肠癌抗原(CCA)含量。用纯化的抗体包被微孔板, 然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。试剂盒组成
标本要求 1.标本采集后尽早进行提取, 实验原理 人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人结肠癌抗原(CCA)水平。甩干,待测样品孔。 |